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        上海滬崢生物科技有限公司
        產品展廳
        寨卡(zika)病毒試劑盒(熒光-PCR法)
        • 品牌:上海滬崢
        • 產地:國內
        • 型號:50T/盒
        • 貨號:HXG706
        • 價格: ¥2380/盒
        • 發布日期: 2021-03-22
        • 更新日期: 2025-12-15
        產品詳請
        產地 國內
        品牌 上海滬崢
        貨號 HXG706
        用途 僅用科研
        包裝規格 50T/盒
        是否進口

        寨卡(zika)病毒試劑盒(熒光-PCR法)為上海滬崢PCR主要產品之一,產品優勢 樣品種類多,質控嚴格,高特異性,供貨快,已被國內外廣大科研工作者使用,被稱謂:質量信得過產品
        通用名稱:寨卡(zika)病毒試劑盒(熒光-PCR法)

        規格:50T/盒

        英文名稱:zika Detection Kit (Real-Time PCR Method)

        自備試劑:樣品 RNA

        【檢驗原理】

        本試劑盒對寨卡(zika)病毒基因保守區設計特異性的引物和探針[1-3],用熒光 PCR 技術對核酸進行體外擴增檢測,從而達到快速檢測之目的。

        寨卡(zika)病毒試劑盒(熒光-PCR法)試劑組成】

        酶液

        50μL×1 管

        zika反應液

        500μL×2 管

        zika陽性質控品

        50μl ×1 管

        陰性質控品

        250μl×1 管

        【儲存條件及有效期】

        -20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融不超過 5 次。有效期 12 個月。

        【適用儀器】

        ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。

        【標本采集】取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g。

        【保存和運輸】上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃。但不能超過 6 個月,標本運送應采用 0℃冰代。【使用方法】樣品處理(樣本處理區)


        1.1 樣本前處理:

        取動物組織及其制品、食品或飼料約 1g,剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續研磨,待勻漿后轉至 1.5mL 滅菌離心管中, 8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 1.5mL 滅菌離心管中。

        2 DNA 提取

        樣本 DNA 的提取采用 DNA 取試劑盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

        試劑配制(試劑準備區)

        根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 10 份,多配制 1 ),每測試反應體系配制如下表:

        試劑

        zika 反應液

        酶液

        用量

        20μL

        1μL

        加樣(樣本處理區)


        將步驟 1 提取的 DNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μL,加入相應的反應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

        PCR 擴增(核酸擴增區)

        4.1 將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;

        4.2 設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25ul;熒光通道選擇: 檢測通道

        Reporter Dye)FAM, 淬滅通道Quencher Dye)NONE,請勿選擇 ROX 參比熒光。

        4.3 推薦循環參數設置:

        步驟

        循環數

        溫度

        時間

        收集熒光信號

        1

        1 cycle

        95℃

        10min

        2

        40 cycles

        94℃

        15sec

        55℃

        30sec


        意事項

        :所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。

        1. 樣本處理(樣本處理區)

        待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。

        2. 擴增試劑準備(PCR前準備區)

        N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μlRT-PCR1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)

        組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。

        1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區。

        2.加樣(樣本處理區)

        3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區。

         





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